Основний принцип синтезу ДНК

Хімічний синтез ДНК базується на стратегії твердофазного синтезу та хімії фосфорамідиту.На відміну від біологічного синтезу ДНК, матеріалом для хімічного синтезу ДНК є DMT (4, 4-диметокситритил) і дезоксирибоксисид, модифікований фосфорамідитом, як показано на малюнку 1. Синтез ДНК здійснюється на твердій основі (ми можемо запропонувати різніКолонка олігосинтезу), тобто CPG (скло з контрольованими порами) і PS (полістирол), і весь синтез виконується наСинтезатор ДНК/РНК, яке є нашим основним обладнанням, має різні моделі, такі як: одноканальний синтезатор HY, HY-12, HY-192 тощо, напрямок синтезу від 3' до 5', і нуклеотид вводиться на тверду опору через один цикл синтезу.Зазвичай цикл синтезу складається з чотирьох етапів: зняття захисту, з’єднання, блокування та окислення (рис. 2).Зняття захисту встановлено для видалення DMT-групи на твердому носії або 5'-гідроксильної групи на попередньому нуклеозиді, 3% трихлороцтової кислоти в дихлорметані використовується як реагент для зняття захисту.Потім модифікованому фосфорамідитом дезоксирибоксизиду дозволяли оголити гідроксильну групу за допомогою активатора, тобто 5-етилтіотетразолу або 4,5-діціаноімідазолу, утворюючи фосфітетріестер (III), і реалізували стадію сполучення.Етап блокування виконується для блокування гідроксильної групи, що не прореагувала, під час етапу приєднання, щоб мінімізувати утворення небажаних дефектних послідовностей.Нарешті, нестабільний фосфітетріестер (III) окислюється до хімічно стабільного фосфортріестеру (V) за допомогою йоду як окислювача в присутності піридину.

Синтезована ДНК може бути відщеплена від твердої підкладки шляхом амінолізу, 2-ціаноетил-захищена група на фосфортриефірі та амід на нуклеооснові відщеплюються одночасно, пластини для синтезу та колонки для синтезу в стійках розміщуються безпосередньо в реакційній камері. зОбладнання для зняття захисту.Неочищена ДНК може бути отримана за допомогою ВЕРХ, електрофорезу та OPC на вимогу, ми також можемо надати вамОчисне обладнаннядля постобробки.